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实验五、紫外分光光度法
——未知样品中萘含量的测定
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一、
目的要求
1.
了解紫外吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用;
2.
学习有机化合物的定量分析方法。
二、
方法原理
许多有机化合物紫外区域就有特征的吸收光谱,从而可以用来进行有机物的鉴定及结构分析。此外还可以对同分异构体进行鉴别。对具有键和共轭双键的化合物特别灵敏,其在紫外区就有强烈吸收,该法在有机物分中可以进行:(1)纯度检查;(2)未知样品的鉴定;(3)分子结构的推测;(4)互变异构体的判别;(5)定量测定。
萘—乙醇溶液在210~230nm之间有一强的吸收峰,在一定浓度范围内,吸光度遵守比尔定律,借此可以进行奈的定量测定。
三、
仪器及试剂
1.
可见紫外分光光度计(美国PE公司);
2.
萘—乙醇溶液:浓度为10μg/mL及1μg/mL。
四、
实验步骤
1.
吸收光谱的测量:以95%乙醇溶液为参比溶液,用1厘米石英比色皿,装浓度为1μg/mL萘—乙醇溶液,测其紫外吸收光谱。波段从210~230nm,间隔2nm。要求找出最大吸收峰的位置(用仪器扫描)。
2.
工作曲线的绘制:
(1)
分别移取 0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.501μg/mL萘—乙醇溶液,于6个10mL带塞比色管中,用95%乙醇稀释至刻度,摇匀。
(2)
于最大吸收波长(220nm)处,用1㎝石英比色皿,在光度计上,测定标准系列的吸光度,浓度从低到高,记录吸收值。(标准曲线)
(3)
对几个未知样中的萘含量进行测定。测定时的条件与标准系列一致。试样含量高时,可用乙醇稀释后测定(测定时比色皿应加盖)。
五、
结果与讨论
1.
绘制萘—乙醇溶液吸收曲线及工作曲线。
2.
求未知样品中萘的含量。
3.计算最大吸收峰处的摩尔吸光系数。 |
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